Mis on ELISA mikroplaadilugeja?
Mikroplaadilugeja, st ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs, on spetsiaalne vahend ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsiks. Tegelikult on see varjatud spetsiaalne fotoelektriline kolorimeeter või spektrofotomeeter ning selle põhiline tööpõhimõte on põhimõtteliselt sama, mis põhistruktuur ja fotoelektriline kolorimeeter. Seda saab lihtsalt jagada kahte kategooriasse, poolautomaatseks ja täisautomaatseks, kuid nende tööpõhimõtted on põhimõtteliselt samad. Selle tuum on kolorimeeter, st kolorimeetrilist meetodit kasutatakse antigeeni või antikeha sisalduse analüüsimiseks. ELISA määramiseks on üldjuhul vaja, et katselahenduse lõplik maht oleks väiksem kui 250 μL ja katset ei saa täita üldise fotoelektrilise kolorimeetriga, seega on mikroplaadilugejas fotoelektrilise kolorimeetri jaoks erinõuded.
Põhimõte
Mikroplaadilugeja on tegelikult varjatud eriotstarbeline fotoelektriline kolorimeeter või spektrofotomeeter ning selle põhiline tööpõhimõte on põhimõtteliselt sama, mis põhistruktuur ja fotoelektriline kolorimeeter. Joonisel on näidatud ühe kanaliga automaatse proovivõtu mikroplaadilugeja töö. Skemaatiline skeem. Valgusallika lambist eralduv valguslaine muundatakse filtri või monokromaatoriga monokromaatiliseks valguseks ja siseneb uuritavasse proovi plastikust mikropoorsesse poolusesse. Osa monokromaatilisest valgusest neeldub proovi poolt ja teine osa edastatakse fotodektorile valgustatud proovi kaudu, fotodetektor teisendab testitava proovi erinevad valgussignaalid vastavateks elektrisignaalideks. Elektrilisi signaale töödeldakse eelvõimenduse, logaritmilise võimenduse ja analoog-digitaalse muundamise teel. Sisestage andmetöötluseks ja arvutamiseks mikroprotsessor ning lõpuks kuvage tulemused ekraani ja printeri poolt. Mikroprotsessor kontrollib ka mehaanilise ajamimehhanismi liikumist X-suunas ja Y suunas, et liigutada mikroplaati läbi juhtimisahela, et realiseerida automaatne proovide tuvastamise protsess. Teised mikroplaadilugejad kasutavad avastamiseks mikroplaadi käsitsi liikumist, nii et X- ja Y-suunaline mehaaniline ajamimehhanism ja juhtimisahel jäetakse välja, nii et seade on väiksem ja struktuur on lihtsam.
Mikroplaat on läbipaistev plastplaat, mida kasutatakse spetsiaalselt testimiseks kasutatava proovi paigutamiseks. Plaadil on mitu rida väikese suurusega väikeseid auke ja vastav antigeen või antikeha on auku kinnitatud. Iga väike auk mahutab paar kümme milliliitrit lahust.
Valgus on elektromagnetiline laine. Lainepikkust 100nm-400nm nimetatakse ultraviolettvalguseks, inimese silm võib jälgida valgust vahemikus 400nm kuni 780nm ja lainepikkust üle 780nm nimetatakse infrapunavalguseks. Inimesed näevad värve ainult seetõttu, et valgus tabab objekti ja objekt peegeldub tagasi. Rohelised taimed on rohelised, sest enamik taimi neelab punaoranži valgust ja sini-violetset valgust, kuid nad ei ima ega peegelda rohelist, nii et taimed tunduvad rohelised. Mikroplaadilugeja mõõtmise põhimõte on tuvastada analüütide neeldumine konkreetsel lainepikkustel.
Struktuur
Seal on 40-kaevu plaadid, 55-kaevu plaadid, 96-kaevu plaadid jne. Erinevad instrumendid kasutavad erinevaid avaplaate, mida saab testida ükshaaval või rida-realt.
Mikroplaadilugeja kasutatavat monokromaatilist valgust saab kas sidusa filtri või sama monokromaatori kaudu kui spektrofotomeeter. Filtri kasutamisel filtriseadmena on see sama, mis tavaline värvimeeter. Seda saab paigutada mikroplaadi ette või mikroplaadi taha. Pärast kondensaatorit jõuab diafragma reflektorini, see peegeldub reflektoris 90° juures ja läbib kolorimeetrilise lahuse vertikaalselt ning saadetakse seejärel läbi filtri. Fotoelemendi juurde.
Mikroplaadilugeja tööploki diagrammist ja valgustee diagrammist on näha, et sellel on järgmised erinevused tavaliste fotoelektriliste kolorimeetritega:
(L) Katsetatav kolorimeetrilise lahuse konteiner ei kasuta enam küvetti, vaid plastikust mikroplaati. Mikroplaat on tavaliselt valmistatud läbipaistvast polüetüleenist materjalist, millel on tugev adsorptsiooniefekt antigeenile ja antikehale, seega kasutatakse seda See toimib tahke faasi kandjana.
(2) Kuna proovi sisaldav plastmikroplaat on mitmerealine poorne, saab valgus läbida ainult vertikaalselt, nii et mikroplaadilugeja valguskiir läbib katsetatava lahuse ja mikroplaadi vertikaalselt. Valguskiir võib olla ülevalt alla või See võib läbida kolorimeetrilise vedeliku alt üles.
(3) Mikroplaadilugejad ei kasuta tavaliselt mitte ainult A-d, vaid mõnikord kasutavad neeldumise väljendamiseks ka optilist tihedust OD. Mikroplaadilugejaid saab jagada kahte tüüpi: ühe kanali ja mitme kanaliga ning ühe kanaliga jagatakse kahte tüüpi: automaatne ja manuaalne. Automaatne instrumendi tüüp X- ja Y-suundades on mehaaniline ajamimehhanism, mis võib testimiseks saata mikroplaadi L väikesed augud ükshaaval tala alla ja manuaalne tüüp kasutab mõõtmiseks mikroplaadi käsitsi liikumist.
Ühekanalilise mikroplaadilugeja põhjal on välja töötatud mitmekanaliline mikroplaadilugeja. Seda tüüpi mikroplaadilugeja on üldiselt automatiseeritud. Sellel ei ole mitut tala ja mitut fotodetektorit, näiteks 12-kanaliline instrument 12 või 12 valgusallikaga, 12 detektorit ja 12 võimendit, mehaanilise ajamiseadme toimel X suunas, tuvastatakse 12 proovi järjest. Mitme kanaliga mikroplaadilugeja avastamiskiirus on kiire, kuid selle struktuur Keerulisemad hinnad on samuti kõrgemad.
Mikroplaadilugeja rakenduste valik
Hematoloogia test Trombotsüütide seotud antikehade test PAIgA, PAIgG, PAIgM
D-Dimer D-Dimeri määramine
Seerumi fibriini lagunemissaaduste FDP määramine
T3, T4 määramine triiodotüroniini ja tetraiodotüroniiniga
Immunoloogiline test C-reaktiivse valgu määramine CRP
Immunoglobuliini IgD, IgE määramine
Tsirkuleerivate immuunkomplekside määramine CIC
Reumatoidfaktori IgG, IgA, IgM RF määramine
Türoglobuliini vastane antikeha, mikrosoomsete antikehade määramine TG, TM
Kasvajavähi immunoloogiline avastamine Alfa-fetoproteiini määramine AFP
Kartsinoembrüoonilise antigeeni CEA määramine
Eesnäärmespetsiifilise antigeeni PSA määramine
Kõhunäärmevähi, sapiteede vähi, maovähi CA19-9 määramine
Munasarjavähi määramine CA125
Rinnavähi määramine CA15-3
Emakakaela kkrakulise kartsinoomi SCC määramine
Mitme luuüdivähi avastamine
Kilpnäärmevähi määramine hTG
Nakkushaiguste immunoloogiline test, A-hepatiidi seroloogiline test, HAV-IgM-vastane
B-hepatiidi seroloogia test Kaks ja pool paari
C-hepatiidi seroloogia avastamine ANTI-HAV-IgG, HCV-IgM vastane
D-hepatiidi anti-HDV-IgG seroloogiline avastamine, ANTI-HDV-IgM
E-hepatiidi anti-HEV-IgG seroloogiline avastamine
Neerusündroomi HFRS-IgG hemorraagilise palaviku antikehade avastamine
Jaapani entsefaliidi viiruse antikeha IgM avastamine
Inimese immuunpuudulikkuse viiruse antikehade (st piirkondlik AIDS) AVASTAMINE HIV β 2 M
Sünnieelne ja postnataalne hooldusfunktsiooni test Toxoplasma viiruse test TOXO
Punetiste viiruse tuvastamine RV
Tsütomegaloviiruse tuvastamine CMV
Herpes simplex viiruse Avastamiseks Anti-HSV (I., II.)
Teised võivad teha ka geneetilisi katseid ja loomseid jääke, pestitsiidijääkide kontrollvahendeid jne.
